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常見的DNA純化方法

 更新時間:2023-10-10    點擊量:4139
 在分子生物學(xué)實驗中,提純DNA樣本是十分常見的步驟,下面給大家介紹幾種常見的DNA純化方法,一起來看看吧!

一、苯酚-氯仿抽提法

苯酚和氯仿是常見的有機溶劑,一般可以用來將蛋白雜質(zhì)從DNA樣本里去除?;驹硎?,有機溶劑會使雜質(zhì)蛋白變性,并將雜質(zhì)蛋白留在有機溶劑層,而DNA分子是有水溶性的,所以會進入水溶液層。這樣DNA和雜質(zhì)蛋白就被分開了。這個方法的好處是便宜有效,特別是在提取基因組DNA時,要去掉許多從細胞裂解液中帶來的蛋白,苯酚法十分好用但苯酚和氯仿是有毒溶劑,而且有可能會殘留在提純過后的DNA樣本中,對后續(xù)反應(yīng)造成影響。

二、乙醇沉降法

乙醇沉降法其實就是一種鹽析方法。鹽陽離子(一般是Na+、醋酸鈉鹽)和70%的乙醇加入到DNA樣本中后,陽離子與帶負電的DNA骨架相互作用,從水分子那里將DNA搶奪出來,而乙醇改變了DNA的結(jié)構(gòu),使得DNA聚合最終沉降。

三、磁珠吸附法

原理是在攜帶正電的磁珠和DNA分子特定結(jié)合后,磁珠被固定在磁極上,DNA樣本中的其他雜質(zhì)在此時被移除,而后使用高pH的洗出液使得磁珠帶負電,因此DNA分子又會脫離磁珠,被洗出。

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