Elabscience甲酸鹽比色法測試盒適用于檢測動(dòng)物組織樣本及血清(漿)等液體樣本中甲酸鹽的含量。

甲酸脫氫酶(FDH)能夠催化甲酸和 NAD+反應(yīng)產(chǎn)生 NADH，NADH在PMS作用下，將電子傳遞給 WST-8，生產(chǎn)黃色的產(chǎn)物，其在450 nm處有特征吸收峰。樣本中自身存在的NAD(P)H會(huì)產(chǎn)生一定的背景干擾，因此在測定過程中需要設(shè)定對(duì)照孔排除這種干擾。

試劑準(zhǔn)備

① 檢測前，試劑盒中的試劑平衡至室溫。

② 試劑二工作液的配制：

取一支試劑二粉劑用0.17 mL試劑一充分溶解，臨用前配制，于冰盒上取用，-20℃避光可保存7天。

③ 試劑三工作液的配制：

取一支試劑三粉劑用0.3 mL的試劑一充分溶解，臨用前配制，于冰盒上取用，-20℃避光可保存7天。

④ 測定工作液的配制：

按照試劑一：試劑二工作液：試劑三工作液：試劑四 = 8：1：1：10的體積比混勻，按需要現(xiàn)配現(xiàn)用，避光保存。

實(shí)驗(yàn)關(guān)鍵點(diǎn)

① 試劑一取用時(shí)應(yīng)倒出部分，再取用，避免試劑污染。

② 樣本加入板孔中時(shí)應(yīng)觸底加入。

操作步驟

① 測定孔：向酶標(biāo)板對(duì)應(yīng)的測定孔中加入50μL的待測樣本；

標(biāo)準(zhǔn)孔：向酶標(biāo)板對(duì)應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μL不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品溶液；

② 向步驟①中各孔分別加入50μL的測定工作液；

③ 酶標(biāo)儀上振板5 s，然后放入37℃恒溫箱中，孵育30 min，于波長450 nm 處測定各孔OD值。

(注：隨著孵育時(shí)間延長，顯色會(huì)加深，在保證樣本正常顯色的情況下，盡量使標(biāo)準(zhǔn)曲線最高點(diǎn)的OD值處于1.5-2.0的范圍內(nèi))

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